檢測(cè)蛋白質(zhì)常用的方法
【本文源自糧油儀器網(wǎng)】對(duì)動(dòng)植物體內(nèi)蛋白質(zhì)的檢測(cè)，我們是有著很多方法的，在這多種方法當(dāng)中，我們需要采取比較常見的方便操作的方法進(jìn)行，這時(shí)我們采取了使用儀器的方法——蛋白質(zhì)測(cè)定儀或者是全自動(dòng)定氮儀，這樣的方式不但節(jié)省了工作時(shí)間，還提高了檢測(cè)的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。這種方法主要是利用動(dòng)植物體內(nèi)的含氮量來測(cè)定蛋白質(zhì)含量的，其中也考慮到蛋白質(zhì)中特定氨基酸殘基、酸性和堿性基團(tuán)以及芳香基團(tuán)等測(cè)定蛋白質(zhì)含量。
蛋白質(zhì)測(cè)定常用的方法是凱氏定氮法，它是測(cè)定總有機(jī)氮的準(zhǔn)確和操作簡(jiǎn)便的方法之一，在國(guó)內(nèi)外應(yīng)用普遍。測(cè)定食品中蛋白質(zhì)的含量對(duì)于了解食品的質(zhì)量，合理膳食，保證不同人體的營(yíng)養(yǎng)需要，掌握食品營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和品質(zhì)變化，對(duì)合理利用資源具有重要意義，同時(shí)為食品生產(chǎn)、加工等提供數(shù)據(jù)。將樣品與濃硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，其中碳和氫被氧化為二氧化碳和水逸出，而樣品中的有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為氨，并于硫酸結(jié)合形成硫酸銨，加堿將消化液堿化，通過水蒸氣蒸餾，使氨蒸出，用硼酸吸收形成硼酸銨，再以鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量可計(jì)算出蛋白質(zhì)的含量。
維護(hù)采場(chǎng)控頂范圍內(nèi)頂煤的穩(wěn)定使其不在架前和支架上方冒落，是放頂煤開采成敗的關(guān)鍵新鮮食品中的含氮化合物大多改寫以蛋白質(zhì)為主體，所以檢驗(yàn)食品中蛋白質(zhì)時(shí)，往往測(cè)定總氮量，然后乘以蛋白質(zhì)換算系數(shù)，即可得到蛋白質(zhì)的含量。
我們?cè)谶M(jìn)行試驗(yàn)的時(shí)候，將濃硫酸和硫酸銅放在一起進(jìn)行反應(yīng)，出現(xiàn)的溶液是出現(xiàn)綠色的，因此硫酸銅除起催化劑作用外，還可以指示消化終點(diǎn)的到達(dá)，也就是說硫酸銅也是一種指示劑，為下一步的蒸餾作為堿性反應(yīng)的指示劑。首先向消化管中加硫酸鉀、硫酸銅，再向消化管中加入樣品樣品質(zhì)量，看樣品狀態(tài)而定，稱樣順序沒有要求。再加入濃硫酸一起放到消化爐上消化，加熱消化到消化管中的液體變?yōu)榱辆G色為止說明消化完全沒有損耗。 凱氏定氮儀中可用的催化劑種類很多，有氧化汞、汞、鋅粉等，但我們應(yīng)該考慮效果、價(jià)格及環(huán)境污染等多種因素，應(yīng)用廣泛的還是硫酸銅，有時(shí)常加入過氧化氫、次氯酸鉀等氧化劑以加速有機(jī)物的氧化分解。
